米曲霉（Aspergillus oryzae）属于好氧性丝状真菌，其菌落生长快，质地疏松，最初为白色，后变为黄绿、绿色或深绿色（图1）。分生孢子起初呈现椭圆形或洋梨形，待成熟后大多转变为球形或者近球形。分生孢子头呈放射状存在，少数为疏松柱形（图2）^[1]。

米曲霉已被美国食品药品监督管理局FDA认证为普遍安全菌株（GRAS）。在我国，米曲霉主要用作酿造食品酱、酱油和各类酒，也可用于生产各类益生素、有机酸、各类动物饲料、酶制剂等。在众多工业化生产菌株中，米曲霉占有重要地位^[2]。

米曲霉固体发酵培养时间长，且反应条件不易控制，重复性较差，而液体发酵培养时间相对较少，反应条件容易实时监控，易于工业扩大化生产^[3]。

本文采用迪必尔生物的CloudReady™云平台平行生物反应器，验证了不同碳源对米曲霉培养的工艺优化。结果显示，在发酵培养对数期时，玉米糊精对米曲霉的菌体生长更有利。但是在放罐时（112h），以葡萄糖和玉米粉为复合碳源的罐体呈现了最优的结果，菌体湿重达到602.3g/L，为所有实验组的最高水平。本研究可为丝状真菌的液体发酵提供数据支持。

工艺参数条件：见表2

本次培养周期为112h，其中在66h时，四个罐体自动同步开始流加（2ml/h，50%葡萄糖）补料，且在89h后，自动同步增加补料速度（15ml/h，50%葡萄糖）。

以玉米糊精为碳源的R1和R2，在40-64h期间，菌体湿重分别增加231.4g/L和211.1g/L，达到最大值。但是在流加补糖后，其增长速度逐渐缓慢，甚至R2呈下降趋势，这有可能是由于此时间段，碳源不同，导致米曲霉的代谢途径不同，以至于消耗葡萄糖的速度不一致，产生糖阻遏现象。

从整体的结果可知，以葡萄糖和玉米粉为复合碳源的R4，在放罐时，菌体湿重最高，达到602.3g/L。这表明，在该补料速度的情况下，该复合碳源更适合米曲霉菌体的增殖。但是以玉米糊精为碳源的R1和R2的潜力不可忽视，除去补料速度对其产生的影响因素，玉米糊精对米曲霉的菌体增殖效果更加明显，如果根据其自身的耗糖速度进行补料速度的策略调整后，最终结果也是不可小觑的。

本次实验基于CloudReady™1.5L×4云平台平行生物反应器具有良好的平行性这一优势，进行了不同碳源或复合碳源的筛选（图6），米曲霉的菌体湿重从40.2g/L增长至602.3g/L，同时，我们也得到验证，米曲霉在发酵培养对数期时，玉米糊精更有利于菌体生长。